Site de l’association HerPAs

Génétique Moléculaire du Virus Herpès Simplex de Type (HSV-1)

Membres de l’équipe

Alberto EPSTEIN DR2 CNRS alberto.epstein-at-univ-lyon1.fr (+33472431325)

Anna GRECO CR1 Inserm anna.greco-at-univ-lyon1.fr(+33472431325)

Loredana ARATA Etudiante en thèse lore­dana.arata-at-univ-lyon1.fr

Matias MELENDEZ Etudiant en thèse matias.melen­dez-at-univ-lyon1.fr

Aleth CALLÉ IE Inserm aleth.calle-at-univ-lyon1.fr

Karine THOINET Technicienne CNRS karine.thoi­net-at-univ-lyon1.fr

Coline BIOLLAY EPHE/tech­ni­cienne Bioviron coline.biol­lay-at-univ-lyon1.fr

Pascal TREMPAT Chef de Projet Bioviron pascal.trem­pat-at-univ-lyon1.fr

Adresse

Centre de Génétique et de Physiologie Moléculaire et Cellulaire (CGPhiMC)

Bt Grégor Mendel

16 rue Dubois

F- 69632 Villeurbanne CEDEX

http://cgphimc.univ-lyon1.fr/spip.php?rubri­que35

Intérêts et objectifs scientifiques

Notre groupe déve­loppe 2 thé­ma­ti­ques majeu­res 1- Développement de vec­teurs viraux déri­vés d’HSV-1 et leur uti­li­sa­tion dans dif­fé­rents pro­jets de recher­che fon­da­men­tale, de thé­ra­pie géni­que et de vac­ci­no­lo­gie. Une des uti­li­sa­tions concerne l’étude de la contri­bu­tion des récep­teurs NMDA des neu­ro­nes pyra­mi­daux de l’hip­po­campe dans la for­ma­tion de nou­vel­les mémoi­res. 2- Etude des inte­rac­tions d’HSV-1 avec les cel­lu­les hôte pour déter­mi­ner le rôle de cer­tai­nes pro­téi­nes cel­lu­lai­res, et plus par­ti­cu­liè­re­ment les pro­téi­nes nucléo­lai­res dont la nucléo­line, dans le deve­nir de l’infec­tion virale. Nous par­ti­ci­pons également acti­ve­ment à l’étude de l’acti­vité « helper » d’HSV-1 pour la répli­ca­tion du virus adéno-asso­cié (AAV), en col­la­bo­ra­tion avec l’équipe d’Anna Salvetti (ENS Lyon)

Compétences techniques

Biologie molé­cu­laire, cel­lu­laire Virologie : pro­duc­tion et titrage de virus herpes, infec­tion de cel­lu­les, …) Génération de virus HSV-1 recom­bi­nants Génération de vec­teurs ampli­con Transfection de cel­lu­les Fractionnement cel­lu­laire poussé : cyto­plasme, noyaux, nucléo­les, nucléo­plasme, ribo­so­mes Extraction, puri­fi­ca­tion, ana­lyse des pro­téi­nes Interaction pro­téi­nes/pro­téi­nes (co-IP, TAP : double puri­fi­ca­tion des com­plexes pro­téi­ques, …) Inhibition de l’expres­sion géni­que par la méthode de siRNA Microscopie à fluo­res­cence et confo­cale Régulation de la trans­crip­tion Régulation de la tra­duc­tion Séparation des pro­téi­nes par électrophorèse bi-dimen­sion­nelle

Collaboration intra et extra association

Anna Salvetti, ENS Lyon

Yohann Couté, CEA Grenoble

Philippe Bouvet, ENS Lyon

Diana Jerusalinsky, Argentine

Roberto Manservigi, Italie

Penelope Mavromara, Grèce

Fernando Corrales, Espagne

Jean-Jacques Diaz, Centre Léon Bérard Lyon

Dernières publications

- Sánchez-Quiles V, Mora MI, Segura V, Greco A, Epstein AL, Foschini MG, Dayon L, Sanchez JC, Prieto J, Corrales FJ, Santamaría E. (2011) HSV-1 Cgal+ Infection Promotes Quaking RNA Binding Protein Production and Induces Nuclear-Cytoplasmic Shuttling of Quaking I-5 Isoform in Human Hepatoma Cells. Mol Cell Proteomics.10(6):M111.009126.

- Nicolas A, Alazard-Dany N, Biollay C, Kuhn L, Ferro M, Weller SK, Epstein AL, Salvetti A, Greco A (2010). Identification of rep-asso­cia­ted fac­tors in HSV-1-indu­ced AAV-2 repli­ca­tion com­part­ments. Journal of Virology 84:8871-87.

- Decker H, Jürgensen S, Adrover MF, Brito-Moreira J, Bomfim TR, Klein WL, Epstein AL, De Felice FG, Jerusalinsky D, Ferreira ST (2010) (2010). N-methyl-D-aspar­tate recep­tors are requi­red for synap­tic tar­ge­ting of Alzheimer’s toxic amy­loid-β pep­tide oli­go­mers. J Neurochem. 115:1520-9.

- Adrover MF, Muñoz MJ, Baez MV, Thomas J, Kornblihtt AR, Epstein AL, Jerusalinsky DA (2010). Characterization of spe­ci­fic cDNA back­ground syn­the­sis intro­du­ced by reverse trans­crip­tion in RT-PCR assays. Biochimie 92:1839-46.

- Tsitoura E, Epstein AL (2010). Constitutive and Inducible Innate Responses in Cells Infected by HSV-1-Derived Amplicon Vectors. Open Virol J. 4:96-102.

- Marconi P, Manservigi R, Epstein AL (2010). HSV-1-deri­ved helper-inde­pen­dent defec­tive vec­tors, repli­ca­ting vec­tors and ampli­con vec­tors, for the treat­ment of brain disea­ses. Curr Opin Drug Discov Devel. 13:169-83. Review.

- Foka P, Pourchet A, Hernandez-Alcoceba R, Doumba PP, Pissas G, Kouvatsis V, Dalagiorgou G, Kazazi D, Marconi P, Foschini MG, Manservigi R, Konstadoulakis MM, Koskinas J, Epstein AL, and Mavromara P (2010). Novel tumour-spe­ci­fic pro­mo­ters for trans­crip­tio­nal tar­ge­ting of hepa­to­cel­lu­lar car­ci­noma by herpes sim­plex virus vec­tors. Journal of Gene Medicine 12 (12) :956-967.

- Greco A (2009). Involvement of the nucleo­lus in repli­ca­tion of human viru­ses. Reviews in Medical Virology 19 : 201-214. Review. Santamaría E, Mora MI, Potel C, Fernández-Irigoyen J, Carro-Roldán E, Hernández-Alcoceba R, Prieto J, Epstein AL, Corrales FJ (2009). Identification of repli­ca­tion-com­pe­tent HSV-1 Cgal+ strain signal­ling tar­gets in human hepa­toma cells by func­tio­nal orga­nelle pro­teo­mics. Molecular and cel­lu­lar pro­teo­mics, 8 : 805-815.

- Santamaría E, Mora MI, Carro-Roldán E, Molina M, Fernández-Irigoyen J, Marconi P, Manservigi R, Greco A, Epstein AL, Prieto J, Hernández-Alcoceba R, Corrales FJ (2009). Identification of repli­ca­tion-com­pe­tent HSV-1 Cgal+ strain tar­gets in a mouse model of human hepa­to­car­ci­noma xeno­graft. J Proteomics. 73:153-60. Alazard-Dany N, Nicolas A, Ploquin A, Strasser, R., Greco A, Epstein AL, Fraefel C and Salvetti A (2009). Definition of herpes sim­plex virus type 1 helper acti­vi­ties for adeno-asso­cia­ted virus early repli­ca­tion events. PLoS Pathog 5, e1000340.

- Epstein AL (2009). HSV-1-deri­ved ampli­con vec­tors : recent tech­no­lo­gi­cal impro­ve­ments and remai­ning dif­fi­culties. Mem Inst Oswaldo Cruz. 104:399-410. Review.

- Marconi P. Argnani R, Epstein AL and Manservigi R (2009). HSV as a vector in vac­cine deve­lop­ment and gene the­rapy. Adv Exp Med Biol 655:118-144.

- Epstein AL (2009). Progress and pros­pects : bio­lo­gi­cal pro­per­ties and tech­no­lo­gi­cal advan­ces of herpes sim­plex virus type 1-based ampli­con vec­tors. Gene Ther. 16:709-15. Review

- Tsitoura E, Thomas J, Cuchet D, Thoinet K, Mavromara P, Epstein AL (2009). Infection with herpes sim­plex type 1-based ampli­con vec­tors results in an IRF3/7-depen­dent, TLR-inde­pen­dent acti­va­tion of the innate anti­vi­ral res­ponse in pri­mary human fibro­blasts. Journal of General Virology. 90:2209-20.